CNVplex?采用連接酶高特異性連接反應(yīng)對(duì)目的區(qū)域進(jìn)行雜交、連接,通過(guò)專利技術(shù)在連接探針末段引入不同長(zhǎng)度的標(biāo)簽序列獲得長(zhǎng)度各異的目的探針連接產(chǎn)物,利用熒光標(biāo)記的通用引物對(duì)連接產(chǎn)物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,通過(guò)熒光毛細(xì)管電泳對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳分離檢測(cè),最后通過(guò)對(duì)電泳圖譜的分析獲取各個(gè)位點(diǎn)的峰高,進(jìn)而對(duì)樣品目的區(qū)域的拷貝數(shù)進(jìn)行分析確定。
拷貝數(shù)計(jì)算:
1)輸出每個(gè)峰高數(shù)值(H值),如圖中H(T1), H(R), H(T2)
2)計(jì)算各個(gè)目標(biāo)區(qū)峰相對(duì)參照峰的比值(R值),如R(T1)= H(T1)/ H(R)
3)將檢測(cè)樣本的各個(gè)目標(biāo)區(qū)R值除以對(duì)照樣本的相應(yīng)目標(biāo)區(qū)R值(RR值)再乘以對(duì)照樣本該目標(biāo)區(qū)的拷貝數(shù)(通常為2)即獲得檢測(cè)樣本各個(gè)目標(biāo)區(qū)的拷貝數(shù), 如檢測(cè)樣本RR(T1)=0.5,但如果對(duì)照樣本RR(T1)=1,而T1在對(duì)照樣本中的拷貝數(shù)為2,則檢測(cè)樣本數(shù)T1的拷貝數(shù)=0.5/1×2=1
圖1 CNVplex?原理圖
應(yīng)用領(lǐng)域:
本方法適用于各個(gè)涉及到DNA拷貝數(shù)變異研究的遺傳研究領(lǐng)域,例如疾病基因組研究、腫瘤基因組研究、臨床分子診斷研究、植物基因組研究、動(dòng)物基因組研究等。尤其適合針對(duì)較大候選區(qū)域、檢測(cè)密度要求較高的DNA拷貝數(shù)分析,以及全基因組CNV研究后進(jìn)行進(jìn)一步的大樣品驗(yàn)證研究。
天昊生物最新CNV多重檢測(cè)專利新技術(shù),給您帶來(lái)前所未有的拷貝數(shù)檢測(cè)新體驗(yàn)!更準(zhǔn)確、更快速、更便宜!
1) 通量高:可同時(shí)實(shí)現(xiàn)48-480個(gè)區(qū)段拷貝數(shù)快速檢測(cè),檢測(cè)效率大大增加。
2) 準(zhǔn)確性高:基于高特異性的連接原理,檢測(cè)區(qū)域連接產(chǎn)物采用通用引物擴(kuò)增,擴(kuò)增效率基本一致,平均檢測(cè)CV<10%。
3) 分辨率高:可對(duì)6拷貝以內(nèi)的片段進(jìn)行準(zhǔn)確定量。
4) 重復(fù)性高:檢測(cè)穩(wěn)定性高,節(jié)約樣品復(fù)孔的檢測(cè)費(fèi)用
5) 快速高效:使用的探針短,可以直接合成,無(wú)需克隆制備,更快。
檢測(cè)對(duì)象:
基因組DNA
服務(wù)內(nèi)容:
1. 課題的設(shè)計(jì)咨詢包括檢測(cè)區(qū)域和候選基因區(qū)域的選擇與探針的鋪設(shè);
2. DNA樣本的質(zhì)檢與標(biāo)化;
3. CNVplex?檢測(cè)探針的設(shè)計(jì)、合成與優(yōu)化;
4. CNVplex?高通量多重DNA拷貝數(shù)檢測(cè);
5. DNA拷貝數(shù)檢測(cè)數(shù)據(jù)的分析與結(jié)果報(bào)告。
CNVplex?數(shù)據(jù)結(jié)果準(zhǔn)確和高重復(fù)性
(195個(gè)樣本同一目的區(qū)域2個(gè)探針檢測(cè)結(jié)果)
CNVplex?比Realtime-qPCR具有更準(zhǔn)確的結(jié)果和更高的分辨率
檢測(cè)實(shí)例